a. Esquema de la orientaci\u00f3n transin\u00e1ptica anter\u00f3grada interseccional de las neuronas que reciben entradas monosin\u00e1pticas de dos regiones cerebrales aguas arriba. b. Fluorescencia de EYFP en c\u00e9lulas 293T transfectadas con combinaciones de pl\u00e1smidos recombinasa (pAAV-hSyn-Cre o pAAV-hSyn-Flpo-3FLAG) y dependiente de recombinasa (pAAV-EF1-DIO-EYFP o pAAV-EF1-fDIO-EYFP). C. Fluorescencia de EYFP en c\u00e9lulas 293T transfectadas con combinaciones de pl\u00e1smidos Cre, Flpo y Con\/Fon. El pl\u00e1smido pAAV-hSyn-Con\/Fon-EYFP se transfect\u00f3 en todos los pocillos. Virus adenoasociado AAV1 serotipo 1, gen GOI de inter\u00e9s, prote\u00edna fluorescente amarilla mejorada con EYFP. Cr\u00e9dito: Kitanishi T, Tashiro M, Kitanishi N, Mizuseki K <\/p>\n
El cuerpo funciona a trav\u00e9s de un flujo ascendente y descendente de informaci\u00f3n mediado por el cerebro. La entrada recibida a trav\u00e9s de \u00e1reas aguas arriba, como los ojos y los o\u00eddos, se distribuye a su regi\u00f3n aguas abajo apropiada por medio de las neuronas. Seguir las rutas de expresi\u00f3n de virus con infecciones por vectores virales y observar prote\u00ednas sensibles a la luz en una poblaci\u00f3n neuronal con un microscopio de fluorescencia son algunas de las formas en que los cient\u00edficos se dirigen gen\u00e9ticamente a estas neuronas para comprender mejor su estructura y funci\u00f3n en el flujo general de informaci\u00f3n. \u00abSin embargo, estos m\u00e9todos por s\u00ed solos tienen una capacidad limitada para dirigirse a las neuronas que reciben entradas monosin\u00e1pticas de dos regiones ascendentes distintas, lo que a su vez inhibe nuestra capacidad para centrarnos en la estructura y funci\u00f3n de las neuronas en una escala m\u00e1s fina\u00bb, afirma Kenji Mizuseki, profesor del Departamento de Fisiolog\u00eda de la Facultad de Medicina de la Universidad de la Ciudad de Osaka. <\/p>\n
Un art\u00edculo de biolog\u00eda de las comunicaciones publicado el 22 de febrero detalla c\u00f3mo el profesor Mizuseki dirigi\u00f3 a un equipo de investigadores para desarrollar un m\u00e9todo que denominan \u00absistema de orientaci\u00f3n transin\u00e1ptica anter\u00f3grada interseccional\u00bb, que etiqueta gen\u00e9ticamente las neuronas con un solo gen de inter\u00e9s (GOI), en este case un gen que codifica una prote\u00edna fluorescente amarilla mejorada. Demuestran este m\u00e9todo de etiquetado en dos circuitos cerebrales de rat\u00f3n diferentes: la retina\/corteza visual primaria al col\u00edculo superior y la corteza motora bilateral al cuerpo estriado dorsal.<\/p>\n
Los vectores virales son herramientas com\u00fanmente utilizadas para entregar material gen\u00e9tico en c\u00e9lulas, lo que permite rastrear el camino gen\u00e9tico que toma un virus cuando se combina con otras c\u00e9lulas. Esto puso a pensar al equipo. Podr\u00edan inyectar virus con genes en diferentes \u00e1reas aguas arriba del cerebro que, una vez combinados en regiones aguas abajo especialmente preparadas, alterar\u00edan el entorno gen\u00e9tico para producir esta prote\u00edna fluorescente amarilla mejorada que podr\u00edan observar con un microscopio de fluorescencia. \u00abEsta combinaci\u00f3n de la tecnolog\u00eda existente serotipo 1 del virus adenoasociado (AAV1) y el sistema de expresi\u00f3n interseccional (INTRSECT)\u00bb, afirma el primer autor del estudio, Takuma Kitanishi, \u00abtrae lo mejor de ambos mundos para un m\u00e9todo de etiquetado que podr\u00eda exhibir especificidad sin\u00e1ptica. \u00ab<\/p>\n
Usando modelos de rat\u00f3n, el equipo se puso a trabajar.<\/p>\n
Introdujeron virus preparados gen\u00e9ticamente en las regiones anteriores -presin\u00e1pticas- del ojo derecho y la corteza visual izquierda (V1), y en el col\u00edculo superior izquierdo postsin\u00e1ptico (sSC), observ\u00e1ndose muchas neuronas emisoras de fluorescencia en el sSC izquierdo pero no en las regiones adyacentes. \u00abTambi\u00e9n observamos una ausencia de fluorescencia cuando se omiti\u00f3 cualquiera de los virus anteriores\u00bb, agrega el profesor Mizuseki. Para solidificar que el equipo estaba observando un circuito espec\u00edfico entre la retina\/V1 y el sSC, prepararon todo el cerebro introduciendo un vector viral que cruza la barrera hematoencef\u00e1lica. Adem\u00e1s de las neuronas fluorescentes en el sSC, el equipo tambi\u00e9n las observ\u00f3 en el n\u00facleo geniculado ventral izquierdo (LGNv). Dado que esta regi\u00f3n no se proyecta hacia atr\u00e1s a la retina o V1, plantean la hip\u00f3tesis de que el LGNv contiene neuronas que integran entradas de la retina y V1. Este resultado adicional y la investigaci\u00f3n posterior de probar la solidez de su trabajo es un pico en el enfoque potencial que ofrece su nuevo m\u00e9todo.<\/p>\n
Pasando a la corteza motora (M2), donde se sabe que el cuerpo estriado dorsal (DS) recibe entradas de M2, el equipo quer\u00eda saber si las neuronas de DS recib\u00edan entradas de las regiones M2 izquierda y derecha. Al aplicar su m\u00e9todo, vieron la prote\u00edna fluorescente en todos los tipos de neuronas del s\u00edndrome de Down que examinaron.<\/p>\n
\u00abDespu\u00e9s de estos experimentos\u00bb, afirma el profesor Mizuseki, \u00abest\u00e1 claro que nuestro m\u00e9todo proporciona un medio poderoso para determinar las ubicaciones , n\u00fameros y tipos de c\u00e9lulas de neuronas que reciben entradas monosin\u00e1pticas de las dos regiones aguas arriba definidas\u00bb.<\/p>\n
En el futuro, el profesor Mizuseki expres\u00f3 su inter\u00e9s en expandir este nuevo m\u00e9todo reemplazando el GOI con uno que produce un sensor fotosensible prote\u00edna que luego pueden usar para excitar o suprimir la actividad neuronal con luz. <\/p>\n
Explore m\u00e1s<\/p>\n
La nueva sonda de resonancia magn\u00e9tica puede revelar m\u00e1s sobre el funcionamiento interno del cerebro M\u00e1s informaci\u00f3n:<\/strong> Takuma Kitanishi et al, Intersectional, anterograde transynaptic targeting of neurons receive monosinaptic input from two upstream region, Biolog\u00eda de las Comunicaciones (2022). DOI: 10.1038\/s42003-022-03096-3 Informaci\u00f3n de la revista:<\/strong> Communications Biology <\/p>\n Proporcionado por la Universidad de la Ciudad de Osaka Cita<\/strong>: Nuevo m\u00e9todo utiliza un solo gen para revelar circuits from multiple upstream region (8 de marzo de 2022) recuperado el 29 de agosto de 2022 de https:\/\/medicalxpress.com\/news\/2022-03-method-gene-reveal-neuronal-circuits.html Este documento est\u00e1 sujeto a derechos de autor. Aparte de cualquier trato justo con fines de estudio o investigaci\u00f3n privados, ninguna parte puede reproducirse sin el permiso por escrito. El contenido se proporciona \u00fanicamente con fines informativos.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" a. Esquema de la orientaci\u00f3n transin\u00e1ptica anter\u00f3grada interseccional de las neuronas que reciben entradas monosin\u00e1pticas de dos regiones cerebrales aguas arriba. b. Fluorescencia de EYFP en c\u00e9lulas 293T transfectadas con combinaciones de pl\u00e1smidos recombinasa (pAAV-hSyn-Cre o pAAV-hSyn-Flpo-3FLAG) y dependiente de recombinasa (pAAV-EF1-DIO-EYFP o pAAV-EF1-fDIO-EYFP). C. Fluorescencia de EYFP en c\u00e9lulas 293T transfectadas con combinaciones de … Continuar leyendo \u00abNuevo m\u00e9todo utiliza un solo gen para revelar circuitos neuronales de m\u00faltiples regiones aguas arriba\u00bb<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"","ping_status":"","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[1],"tags":[],"class_list":["post-10911","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-general"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/10911","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=10911"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/10911\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=10911"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=10911"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=10911"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}