Cr\u00e9dito: CC0 Public Domain <\/p>\n
Aproximadamente cuatro meses despu\u00e9s de la descripci\u00f3n inicial de los casos de neumon\u00eda at\u00edpica en Wuhan, China, en diciembre de 2019, el COVID-19 se hab\u00eda convertido en un gran amenaza de pandemia. Para el 12 de abril de 2020, alrededor de la mitad de la poblaci\u00f3n mundial estaba confinada, con 1,8 millones de casos diagnosticados oficialmente. Cient\u00edficos del Institut Pasteur, el CNRS, Inserm y la Universit de Paris realizaron un estudio piloto para evaluar la confiabilidad de varias pruebas de laboratorio con el objetivo de comprender mejor el perfil de las respuestas de anticuerpos al SARS-CoV-2 y c\u00f3mo el virus se est\u00e1 extendiendo entre la poblaci\u00f3n. <\/p>\n
Se desarrollaron y evaluaron cuatro pruebas para la detecci\u00f3n de anticuerpos contra el SARS-CoV-2, as\u00ed como dos pruebas para la detecci\u00f3n de anticuerpos neutralizantes. Estas pruebas, conocidas como ensayos de laboratorio, son una primera etapa en la investigaci\u00f3n epidemiol\u00f3gica sobre el COVID-19. Los resultados de este estudio se publicaron en l\u00ednea en medRxiv el 24 de abril de 2020 y luego en Science Translational Medicine el 17 de agosto de 2020.<\/p>\n
Evaluaci\u00f3n de la prevalencia de casos asintom\u00e1ticos y sintom\u00e1ticos de infecci\u00f3n por SARS-CoV-2 y su perfil de respuesta de anticuerpos es una parte vital de los esfuerzos para contener el brote y arrojar luz sobre c\u00f3mo se est\u00e1 propagando el virus.<\/p>\n
Las pruebas de PCR se utilizan actualmente ampliamente en Francia y en todo el mundo, incluso por el Institut Pasteur (el Instituto Nacional de Centro de Referencia de Virus Respiratorios, en adelante CNR), para el diagn\u00f3stico de la COVID-19 y para la detecci\u00f3n y cuantificaci\u00f3n del ARN del SARS-CoV-2. Estas pruebas virol\u00f3gicas son esenciales para identificar y controlar a las personas con infecci\u00f3n activa.<\/p>\n
Tambi\u00e9n se utilizan varios ensayos serol\u00f3gicos. Hay dos tipos:<\/p>\n
La importancia de las pruebas confiables<\/p>\n
La confiabilidad de estas pruebas es crucial. Varios equipos del Institut Pasteur, el CNRS, el Inserm y la Universit de Paris se propusieron desarrollar ensayos serol\u00f3gicos y realizaron un estudio piloto para evaluar la fiabilidad de cuatro ensayos de detecci\u00f3n midiendo los niveles de anticuerpos contra el SARS-CoV-2. Tambi\u00e9n desarrollaron dos nuevos ensayos de detecci\u00f3n, d\u00e1ndoles un punto adicional de comparaci\u00f3n. Se tomaron grupos de muestras de sangre de diferentes categor\u00edas de individuos. Estos grupos, utilizados para evaluar los ensayos, se pueden desglosar de la siguiente manera:<\/p>\n
Resultados de seroprevalencia<\/p>\n
Seropositividad ( la presencia de anticuerpos) se detect\u00f3 en el 32% de los individuos con signos leves compatibles con COVID-19 en los 15 d\u00edas previos a la toma de muestras, y en el 3% de los donantes de sangre asintom\u00e1ticos.<\/p>\n
Tiempo de respuesta del anticuerpo<\/p>\n
Los cient\u00edficos determinaron el tiempo de respuesta de los anticuerpos en personas hospitalizadas con COVID-19. Los anticuerpos aparecieron de 5 a 6 d\u00edas despu\u00e9s de los primeros s\u00edntomas, con actividad neutralizante despu\u00e9s de 7 a 14 d\u00edas.<\/p>\n
Esta l\u00ednea de tiempo probablemente sea m\u00e1s larga en individuos levemente sintom\u00e1ticos o asintom\u00e1ticos, y los t\u00edtulos de anticuerpos (concentraci\u00f3n) probablemente sean m\u00e1s bajos. <\/p>\n
Descripci\u00f3n y evaluaci\u00f3n de los ensayos<\/p>\n
Los equipos de investigaci\u00f3n dise\u00f1aron cuatro ensayos de laboratorio para evaluar los niveles de anticuerpos contra el SARS-CoV-2 en suero humano.<\/p>\n
Ensayos ELISA: Los dos ensayos ELISA son ensayos convencionales basados en la prote\u00edna N de longitud completa del SARS-CoV-2 (ELISA N) o el dominio extracelular de la prote\u00edna del pico del virus (S).<\/p>\n
Ventajas: estos ensayos son basado en una t\u00e9cnica que se puede transponer f\u00e1cilmente y se utiliza en kits comerciales. El ensayo ELISA S fue ligeramente m\u00e1s sensible que el ensayo ELISA N.<\/p>\n
Para ambos ensayos, se plante\u00f3 la cuesti\u00f3n de c\u00f3mo podr\u00edan usarse a gran escala o comercializarse, ya que actualmente est\u00e1n pruebas de la casa. Ya se han comercializado ensayos basados en un principio similar y actualmente el CNR los est\u00e1 evaluando.<\/p>\n
El CNR eval\u00faa el rendimiento de los ensayos comerciales utilizando muestras de suero determinadas como negativas o positivas para el SARS-CoV-2. anticuerpos sobre la base de al menos dos de los ensayos serol\u00f3gicos desarrollados en el Institut Pasteur.<\/p>\n
Ensayo S-Flow: este ensayo detecta la prote\u00edna del pico del SARS-CoV-2 en su conformaci\u00f3n natural, en la superficie celular . Es muy sensible y espec\u00edfico. Los resultados fueron similares a ELISA S, con mayor sensibilidad para niveles bajos de anticuerpos. Pero el ensayo requiere un equipo especializado (un cit\u00f3metro de flujo) que est\u00e1 menos disponible que los lectores de placas que generalmente se usan en los laboratorios m\u00e9dicos. Esto lo hace m\u00e1s adecuado para su uso en investigaci\u00f3n epidemiol\u00f3gica en lugar de pruebas de diagn\u00f3stico a gran escala.<\/p>\n
Ensayo LIPS: este ensayo de \u00abinmunoprecipitaci\u00f3n\u00bb utiliza una t\u00e9cnica diferente de las otras pruebas y detecta anticuerpos que se unen al SARS-CoV- 2 Prote\u00ednas N o S o sus subdominios. La prueba proporciona un perfil detallado de las regiones de prote\u00ednas virales a las que se dirige la respuesta de anticuerpos. Por lo tanto, el ensayo utiliza varios \u00abant\u00edgenos objetivo\u00bb y la sensibilidad de la prueba var\u00eda seg\u00fan el ant\u00edgeno detectado. Para este estudio se utilizaron parte de N y parte de S (S1). Este ensayo tambi\u00e9n se puede usar en su forma actual en la mayor\u00eda de los animales.<\/p>\n
Los equipos de investigaci\u00f3n tambi\u00e9n desarrollaron dos ensayos para detectar anticuerpos neutralizantes en muestras de suero de individuos infectados, uno que usa el virus infeccioso SARS-CoV-2 y que requieren acceso a un laboratorio BSL3, y uno basado en un \u00abpseudovirus\u00bb que se puede usar sin necesidad de una instalaci\u00f3n BSL3.<\/p>\n
El ensayo de neutralizaci\u00f3n con SARS-CoV-2 infeccioso es m\u00e1s complicado de implementar ya que el virus debe manipularse en un laboratorio BSL3. Utiliza una dosis fija del virus que destruye el 100% de las c\u00e9lulas. Despu\u00e9s de mezclarlo con diferentes diluciones de suero, los cient\u00edficos observan si la presencia de anticuerpos contra el SARS-CoV-2 es suficiente para neutralizar el virus e inhibir la multiplicaci\u00f3n viral, evitando as\u00ed la destrucci\u00f3n celular.<\/p>\n
Los equipos de investigaci\u00f3n tambi\u00e9n desarrollaron un ensayo de neutralizaci\u00f3n conocido como Lenti S, basado en un pseudovirus no infeccioso en lugar del virus SARS-CoV-2. Este ensayo no requiere contenci\u00f3n en un laboratorio de bioseguridad, lo que facilita su implementaci\u00f3n a gran escala.<\/p>\n
A diferencia de los ensayos tipo ELISA, que detectan anticuerpos, un ensayo de neutralizaci\u00f3n mide la capacidad de los anticuerpos para bloquear la entrada de el virus en las c\u00e9lulas. Por lo tanto, puede determinar si un individuo tiene anticuerpos capaces de limitar la multiplicaci\u00f3n del virus y es probable que confiera protecci\u00f3n contra una mayor infecci\u00f3n por SARS-CoV-2. Los equipos de investigaci\u00f3n est\u00e1n ansiosos por adaptar este ensayo para que pueda usarse para pruebas de alto rendimiento. Se necesitar\u00e1 m\u00e1s investigaci\u00f3n para determinar la cantidad de anticuerpos neutralizantes que probablemente confieran protecci\u00f3n y su persistencia en el tiempo.<\/p>\n
Correlaci\u00f3n entre los ensayos<\/p>\n
Para evaluar la fiabilidad comparativa de los ensayos, el los equipos de investigaci\u00f3n los compararon utilizando tres cohortes.<\/p>\n
En pacientes hospitalizados, se obtuvo un n\u00famero similar de casos positivos con los ensayos serol\u00f3gicos basados en N y S; la aplicaci\u00f3n diagn\u00f3stica del ensayo para detectar anticuerpos anti-S1 fue menos sensible, siendo el objetivo de este \u00faltimo investigar una correlaci\u00f3n con la protecci\u00f3n.<\/p>\n
Con la cohorte de individuos sintom\u00e1ticos de Oise, el S-Flow y ELISA Los ensayos S y la combinaci\u00f3n LIPS N+S1 proporcionaron resultados muy similares y niveles de detecci\u00f3n m\u00e1s altos que con las otras pruebas. En los donantes de sangre solo se detectaron casos positivos con los ensayos S-Flow y ELISA S.<\/p>\n
En conclusi\u00f3n:<\/p>\n
1. Los equipos de investigaci\u00f3n compararon el rendimiento de cuatro ensayos de detecci\u00f3n de anticuerpos contra el SARS-CoV-2. En general funcionaron muy bien, con diferencias de sensibilidad seg\u00fan la prueba y sobre todo los ant\u00edgenos a los que se dirigieron.<\/p>\n
2. Con respecto a los ensayos de detecci\u00f3n de anticuerpos neutralizantes, el ensayo de neutralizaci\u00f3n de pseudovirus es simple y robusto pero requiere instalaciones de cultivo celular y equipo especial. Los ensayos serol\u00f3gicos se utilizan para estimar el nivel de anticuerpos que se unen al virus en lugar de anticipar su funcionalidad.<\/p>\n
3. Actualmente, los cient\u00edficos est\u00e1n estableciendo correlaciones para poder estimar qu\u00e9 muestras de sangre tienen capacidad neutralizante en funci\u00f3n de los niveles de anticuerpos que se unen a diferentes partes del virus.<\/p>\n
4. Es probable que la presencia de anticuerpos neutralizantes en la sangre indique protecci\u00f3n contra una infecci\u00f3n adicional, particularmente si el t\u00edtulo es alto, pero esto a\u00fan no se ha demostrado formalmente.<\/p>\n
5. Las pruebas serol\u00f3gicas se pueden utilizar en la investigaci\u00f3n epidemiol\u00f3gica para determinar la seroprevalencia entre grupos espec\u00edficos.<\/p>\n
6. Hubo circulaci\u00f3n significativa del virus dentro del grupo de primeros casos en Oise: el 32% de las personas con signos cl\u00ednicos moderados compatibles con COVID-19 ten\u00edan anticuerpos.<\/p>\n
7. Los resultados de las pruebas realizadas en individuos asintom\u00e1ticos dependieron de los grupos estudiados y su ubicaci\u00f3n. Por ejemplo, de las 200 pruebas realizadas en donantes de sangre asintom\u00e1ticos en Oise (no se permite donar sangre a las personas que presentan signos recientes), el 3 % dio positivo.<\/p>\n
\u00abEstos ensayos se utilizan para detectar la seroprevalencia en estudios epidemiol\u00f3gicos\u00bb. estudios y tambi\u00e9n para diagnosticar individuos. Tambi\u00e9n son muy \u00fatiles para caracterizar completamente los paneles de suero al evaluar las pruebas comerciales. Este estudio involucr\u00f3 a varios equipos del Institut Pasteur, trabajando en cooperaci\u00f3n con m\u00e9dicos y vir\u00f3logos de la Red de Hospitales P\u00fablicos de Par\u00eds (AP-HP) e Inserm, epidemi\u00f3logos y el Servicio Franc\u00e9s de Sangre (EFS). Nos gustar\u00eda pensar en los pacientes y voluntarios que donaron sangre para este estudio\u00bb, enfatizan los coautores del estudio Marc Eloit, Hugo Mouquet, Olivier Schwartz y Sylvie van der Werf. <\/p>\n
\u00abLos ensayos ELISA N y ELISA S son de especial inter\u00e9s en el contexto actual. En el Institut Pasteur se podr\u00edan realizar miles de pruebas cada semana y compartir la t\u00e9cnica con h otros laboratorios\u00bb, explica Sylvie van der Werf, directora del Centro Nacional de Referencia para Virus Respiratorios y \u00faltima autora conjunta del estudio.<\/p>\n
\u00abLos ensayos tipo LIPS tienen la misma sensibilidad que los ensayos tipo ELISA para el mismo ant\u00edgeno y son \u00fatiles para estudiar en detalle la probabilidad de protecci\u00f3n contra m\u00e1s infecciones en cohortes de varios miles de muestras de suero para determinar qu\u00e9 ant\u00edgenos son \u00f3ptimos para pruebas de alto rendimiento, un enfoque que ser\u00e1 crucial para gestionar la flexibilizaci\u00f3n de las medidas de bloqueo. Desde este trabajo, tambi\u00e9n hemos extendido el uso del ensayo LIPS a la detecci\u00f3n de la infecci\u00f3n por coronavirus estacionales y su papel en la protecci\u00f3n o facilitaci\u00f3n de la infecci\u00f3n por SARS-CoV-2\u201d, dice Marc Eloit, Jefe del Laboratorio de Descubrimiento de Pat\u00f3genos. y \u00faltimo autor conjunto del estudio.<\/p>\n
\u00abDesde el comienzo del estudio en marzo de 2020, el ensayo S-Flow se ha utilizado para estudiar el alcance de la respuesta humoral en personas PCR+ con s\u00edntomas leves. Actualmente estamos evaluando la duraci\u00f3n de esta respuesta. Estamos analizando muestras de personas convalecientes recolectadas en diferentes momentos posteriores al inicio de los s\u00edntomas\u00bb, dice Olivier Schwartz, Jefe de la Unidad de Virus e Inmunidad y \u00faltimo autor conjunto del estudio. <\/p>\n
Explore m\u00e1s<\/p>\n
Siga las \u00faltimas noticias en el brote de coronavirus (COVID-19) M\u00e1s informaci\u00f3n:<\/strong> Ludivine Grzelak et al. Una comparaci\u00f3n de cuatro ensayos serol\u00f3gicos para detectar anticuerpos anti-SARS-CoV-2 en muestras de suero humano de diferentes poblaciones, Science Translational Medicine ( 2020). DOI: 10.1126\/scitranslmed.abc3103<\/p>\n www.medrxiv.org\/content\/10.110 … 020.04.21.20068858v1 Informaci\u00f3n de la revista:<\/strong> Science Translational Medicine <\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Cr\u00e9dito: CC0 Public Domain Aproximadamente cuatro meses despu\u00e9s de la descripci\u00f3n inicial de los casos de neumon\u00eda at\u00edpica en Wuhan, China, en diciembre de 2019, el COVID-19 se hab\u00eda convertido en un gran amenaza de pandemia. Para el 12 de abril de 2020, alrededor de la mitad de la poblaci\u00f3n mundial estaba confinada, con 1,8 … Continuar leyendo \u00abDesarrollo de ensayos serol\u00f3gicos para detectar anticuerpos contra el SARS-CoV-2\u00bb<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"","ping_status":"","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[1],"tags":[],"class_list":["post-33907","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-general"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/33907","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=33907"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/33907\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=33907"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=33907"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=33907"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}