{"id":35256,"date":"2022-09-01T05:18:02","date_gmt":"2022-09-01T10:18:02","guid":{"rendered":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/deteccion-rapida-y-economica-del-zika\/"},"modified":"2022-09-01T05:18:02","modified_gmt":"2022-09-01T10:18:02","slug":"deteccion-rapida-y-economica-del-zika","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/deteccion-rapida-y-economica-del-zika\/","title":{"rendered":"Detecci\u00f3n r\u00e1pida y econ\u00f3mica del zika"},"content":{"rendered":"

Se ha utilizado una configuraci\u00f3n de campo para ensayos LAMP para detectar neumon\u00eda en el borrego cimarr\u00f3n y podr\u00eda ayudar en la detecci\u00f3n del zika. y rentable, seg\u00fan los investigadores que describieron una nueva t\u00e9cnica en Science Translational Medicine<\/em> hoy (3 de mayo). El ensayo, que se basa en la amplificaci\u00f3n isot\u00e9rmica mediada por bucle (LAMP), puede distinguir entre las cepas asi\u00e1ticas y africanas del virus y, en teor\u00eda, podr\u00eda usarse para la detecci\u00f3n del virus directamente de los mosquitos en el campo.<\/p>\n

“Simplemente puede tomar mosquitos y triturarlos, o tomar muestras de sangre y otros tipos de muestras de humanos infectados y buscar directamente la presencia de Zika” dijo Richard Kuhn de la Universidad de Purdue en Indiana, quien no particip\u00f3 en el trabajo. “No tiene que hacer la purificaci\u00f3n [ARN], no tiene que hacer la transcripci\u00f3n inversa, as\u00ed que…<\/p>\n

El enfoque permite realizar pruebas en entornos remotos sin necesidad de equipos caros y sofisticados. , agreg\u00f3 Desiree LaBeaud de la Universidad de Stanford, quien tampoco particip\u00f3 en la investigaci\u00f3n. Podr\u00eda ser \u00fatil para la vigilancia de vectores y tambi\u00e9n para el diagn\u00f3stico cl\u00ednico.<\/p>\n

La infecci\u00f3n por el virus del Zika generalmente provoca una enfermedad febril de corta duraci\u00f3n, o es asintom\u00e1tica. Pero el virus tambi\u00e9n se ha relacionado con el s\u00edndrome de Guillain-Barr y otros problemas neurol\u00f3gicos en adultos, as\u00ed como con microcefalia fetal y otros problemas cong\u00e9nitos si las mujeres embarazadas est\u00e1n expuestas.<\/p>\n

Aunque el Zika se identific\u00f3 por primera vez en humanos en \u00c1frica en 1952, no fue hasta el reciente brote de una cepa asi\u00e1tica del virus en Am\u00e9rica del Sur y Central que se determin\u00f3 el v\u00ednculo con la microcefalia. La cepa asi\u00e1tica tiene diferencias de secuencia significativas con la cepa africana, lo que puede haber alterado su virulencia, patolog\u00eda o eficiencia de transmisi\u00f3n. Ahora que la cepa asi\u00e1tica se est\u00e1 extendiendo a lo largo y ancho, y posiblemente extendi\u00e9ndose al territorio de las cepas africanas, distinguir las dos puede volverse a\u00fan m\u00e1s importante.<\/p>\n

El virus Zika en mosquitos o humanos generalmente se detecta en un laboratorio usando un reacci\u00f3n en cadena de la polimerasa de transcripci\u00f3n inversa (RT-PCR). Sin embargo, a medida que surgen infecciones en nuevas ubicaciones, las tareas de vigilancia de mosquitos, diagn\u00f3sticos e identificaci\u00f3n de cepas se simplificar\u00e1n con un ensayo de campo f\u00e1cil y econ\u00f3mico, dijo Joel Rovnak, de la Universidad Estatal de Colorado, quien dirigi\u00f3 el nuevo estudio. Y tuvo una brillante idea de c\u00f3mo hacer uno. Ya hab\u00edamos estado desarrollando un ensayo LAMP [basado en el campo]. . . para detectar organismos de la neumon\u00eda en el borrego cimarr\u00f3n, dijo. As\u00ed que suger\u00ed que lo aplic\u00e1ramos al Zika.<\/p>\n

Al igual que la PCR, LAMP amplifica las secuencias de ADN diana utilizando cebadores de secuencia coincidente. Pero a diferencia de la PCR, que requiere ciclos continuos de la mezcla de reactivos a diferentes temperaturas, LAMP procede a una temperatura constante de 63 C. Esto significa que en lugar de comprar una m\u00e1quina termocicladora de PCR, que oscila entre $15 000 y $20 000, dijo Rovnak, pagamos $250 por un bloque de calor.<\/p>\n

El Zika es un virus de ARN, y su amplificaci\u00f3n requiere que se convierta en ADN. Una enzima transcriptasa inversa realiza esta funci\u00f3n y se ha utilizado tanto para PCR (RT-PCR) como para LAMP (RT-LAMP). Pero hubo alguna evidencia de que la ADN polimerasa de Bacillus stearothermophilus<\/em> utilizada para los ensayos LAMP tambi\u00e9n funciona como una transcriptasa inversa. De hecho, Rovnak descubri\u00f3 que la actividad de la transcriptasa inversa de las enzimas es bastante profunda, lo que significa que podr\u00eda realizar tanto la conversi\u00f3n del ADN como los pasos de amplificaci\u00f3n.<\/p>\n

Al eliminar el paso de la transcripci\u00f3n inversa y usar un bloque de calor simple, al que conectamos una bater\u00eda de cami\u00f3n, dijo Rovnak, sin duda har\u00eda que el ensayo fuera m\u00e1s barato y m\u00e1s m\u00f3vil que la RT-PCR. Pero, \u00bfqu\u00e9 pasa con el aislamiento del ARN en primer lugar? Rovnak tambi\u00e9n ten\u00eda una soluci\u00f3n simple y f\u00e1cil de usar para eso.<\/p>\n

Hace veinte a\u00f1os, comenc\u00e9 a hacer RT-PCR en lisados celulares simples, dijo Rovnak, as\u00ed que sab\u00eda que esencialmente no tiene que aislar ARN de las muestras para proceder a la amplificaci\u00f3n. Efectivamente, simplemente aplastando mosquitos infestados de Zika, a\u00f1adi\u00e9ndolos a tubos que conten\u00edan reactivos LAMP e incubando la suspensi\u00f3n a 63 C, el equipo pudo amplificar el virus de manera s\u00f3lida (identificando correctamente 15 de 15 insectos infectados y 3 de 3 controles negativos ).<\/p>\n

Aunque el equipo a\u00fan no ha realizado el ensayo en mosquitos en el campo, todos los componentes est\u00e1n listos para hacerlo, dijo Rovnak. Los investigadores tambi\u00e9n demostraron que pod\u00edan distinguir las cepas de Zika africanas y asi\u00e1ticas directamente de las c\u00e9lulas infectadas.<\/p>\n

Con el fin de utilizar el ensayo para el diagn\u00f3stico de pacientes, el equipo amplific\u00f3 la cepa asi\u00e1tica directamente del plasma, suero , y muestras de semen de individuos infectados, aunque esto produjo algunos falsos positivos y negativos que, seg\u00fan Rovnak, se debieron a sustancias inhibidoras mal definidas.<\/p>\n

El enfoque LAMP necesitar\u00eda un desarrollo considerablemente mayor antes de que pudiera convertirse en una herramienta de diagn\u00f3stico, dijo Rovnak, pero alentadoramente es tan robusto, preciso y sensible como RT-PCR, pero los reactivos cuestan aproximadamente la mitad.<\/p>\n

N. Chotiwan et al., <\/strong>Detecci\u00f3n r\u00e1pida y espec\u00edfica de virus Zika de linaje asi\u00e1tico y africano, Science Translational Medicine<\/em>, <\/strong>9:eaag0538, 2017.<\/strong><\/p>\n

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