ARRIBA: © ISTOCK.COM, HEITIPAVES<\/p>\n
Las c\u00e9lulas HeLa se han cultivado durante casi 70 a\u00f1os en muchos laboratorios de todo el mundo y durante mucho tiempo se consider\u00f3 que eran un suministro infinito de c\u00e9lulas id\u00e9nticas e inmutables. Sin embargo, una nueva investigaci\u00f3n publicada en Nature<\/em> la semana pasada (18 de febrero) demuestra que las c\u00e9lulas pueden variar sustancialmente de un laboratorio a otro, lo que genera dudas sobre la reproducibilidad de la investigaci\u00f3n realizada con la l\u00ednea celular.<\/p>\n “Me alegra ver este estudio, pero en cierto sentido no me sorprende” dice el bi\u00f3logo molecular Prasad Jallepalli del Memorial Sloan Kettering Cancer Center que no particip\u00f3 en el estudio.<\/p>\n No es el primer informe de que la l\u00ednea de c\u00e9lulas HeLa se ha diversificado desde su creaci\u00f3n: a lo largo de los a\u00f1os, otros han documentado diferencias significativas en la secuencia gen\u00e9tica y la expresi\u00f3n del ARN entre las variantes.<\/p>\n Esta \u00faltima investigaci\u00f3n es el primer an\u00e1lisis exhaustivo de la variaci\u00f3n gen\u00e9tica en una amplia gama de variantes de HeLa: diferentes lotes de HeLa…<\/p <\/p>\n Los resultados sugieren que las c\u00e9lulas HeLa se han convertido en algo ligeramente diferente en cada laboratorio, dice Jallepalli. Lo que estamos viendo es deriva gen\u00e9tica. Una poblaci\u00f3n inicial est\u00e1 evolucionando hacia distintos nichos con el tiempo.<\/p>\n En el estudio, los investigadores recolectaron 14 muestras de HeLa de 13 laboratorios en seis pa\u00edses y las cultivaron en las mismas condiciones de laboratorio. Primero cuantificaron la variaci\u00f3n del n\u00famero de copias del gen, el n\u00famero de repeticiones de un gen dado, lo que revel\u00f3 marcadas diferencias entre sus genomas. Esto fue especialmente notable entre las dos cepas de c\u00e9lulas HeLa m\u00e1s utilizadas, conocidas como HeLa CCL2, considerada la variante original de la l\u00ednea celular, y HeLa Kyoto, una rama de la l\u00ednea celular que tiene propiedades que la hacen \u00fatil para aplicaciones espec\u00edficas, como la generaci\u00f3n de im\u00e1genes. .<\/p>\n An\u00e1lisis posteriores mostraron que muchas de estas diferencias gen\u00e9ticas se traduc\u00edan en cambios en la producci\u00f3n de ARNm y, en menor medida, en cambios en la abundancia de prote\u00ednas. Los perfiles transcript\u00f3micos y prote\u00f3micos de HeLa CCL2 y los linajes de Kyoto son tan diferentes entre s\u00ed como lo son las l\u00edneas de c\u00e9lulas cancerosas de dos tipos diferentes de tejido, informan los investigadores.<\/p>\n Las variantes de HeLa tambi\u00e9n difer\u00edan en la rapidez con que se propagaban. crecen en cultivo, con algunas poblaciones de c\u00e9lulas tardando 17,5 horas en duplicarse, mientras que otras tardaron un poco m\u00e1s de 32 horas en las mismas condiciones de cultivo. Tambi\u00e9n difer\u00edan en sus respuestas a la infecci\u00f3n por Salmonella<\/em>: una variante era menos susceptible a la infecci\u00f3n en comparaci\u00f3n con otras dos, lo que los investigadores atribuyen a los bajos niveles de un complejo proteico que juega un papel en la entrada de bacterias en el hu\u00e9sped. c\u00e9lulas.<\/p>\n En un experimento separado, el equipo investig\u00f3 si la expresi\u00f3n g\u00e9nica cambiaba en variantes HeLa individuales a lo largo del tiempo mediante el cultivo de una l\u00ednea celular durante tres meses. Los investigadores documentaron una diferencia de aproximadamente el 6 por ciento en la expresi\u00f3n g\u00e9nica entre una generaci\u00f3n temprana y una posterior de c\u00e9lulas.<\/p>\n Fue ciertamente muy dram\u00e1tico cu\u00e1nto difer\u00edan estas c\u00e9lulas y qu\u00e9 tan r\u00e1pido cambiaron incluso en el mismo laboratorio. comenta el coautor Ruedi Aebersold, profesor del Instituto de Biolog\u00eda de Sistemas Moleculares de la ETH Zurich. Estima que si un estudiante de posgrado hubiera realizado un experimento con una l\u00ednea de c\u00e9lulas HeLa al comienzo de su proyecto y se le hubiera pedido que lo repitiera despu\u00e9s de seis meses, podr\u00eda haber obtenido resultados diferentes.<\/p>\n Gran parte de la discusi\u00f3n sobre la crisis de reproducibilidad en la investigaci\u00f3n se ha centrado en las fallas en el dise\u00f1o experimental, el an\u00e1lisis de datos y las l\u00edneas celulares contaminadas o mal etiquetadas como factores principales. Pero Aebersold cree que las diferencias biol\u00f3gicas en las c\u00e9lulas HeLa y las l\u00edneas de c\u00e9lulas cancerosas en general podr\u00edan desempe\u00f1ar un papel importante. En las conferencias, a menudo ha observado a los investigadores enzarzados en discusiones acaloradas sobre la obtenci\u00f3n de resultados diferentes del mismo experimento, se\u00f1ala. La implicaci\u00f3n ser\u00eda que uno cometi\u00f3 un error, pero otra explicaci\u00f3n es que las c\u00e9lulas pueden no ser las mismas c\u00e9lulas, explica. <\/p>\n El bi\u00f3logo celular de la Universidad de Stanford, Tim Stearns, ve varias posibles razones por las que las l\u00edneas celulares cambian en cultivos prolongados. Por un lado, las c\u00e9lulas HeLa son c\u00e9lulas cancerosas con inestabilidad gen\u00f3mica conocida y, por lo tanto, es probable que muten al azar con el tiempo. Adem\u00e1s, est\u00e1n sujetos a varias condiciones por crecimiento en el laboratorio que podr\u00edan estar empujando a las c\u00e9lulas a desarrollar caracter\u00edsticas \u00fanicas. Por ejemplo, dice, cultivar c\u00e9lulas de mam\u00edfero implica cultivarlas hasta que llenen un plato, extraer una fracci\u00f3n de las c\u00e9lulas y colocarlas en otro plato para que crezcan en un nuevo proceso llamado divisi\u00f3n. Cada persona lo hace un poco diferente, dice. Esto [aplica] una selecci\u00f3n a las c\u00e9lulas de maneras que no entendemos completamente.<\/p>\n El suero bovino fetal, un ingrediente principal del c\u00f3ctel de factores de crecimiento que se usa para cultivar c\u00e9lulas de mam\u00edferos, tambi\u00e9n puede variar entre laboratorios. No es dif\u00edcil imaginar que en base a la fuente de ese material crear\u00edamos diferentes perfiles transcripcionales y diferentes presiones selectivas, explica Jallepalli. Incluso las cosas simples y humildes, como los platos de pl\u00e1stico, probablemente hagan m\u00e1s de lo que pensamos.<\/p>\n La variaci\u00f3n entre los aislados de HeLa puede preocupar a algunos cient\u00edficos de la vida m\u00e1s que a otros, se\u00f1ala Jallepalli. Los bi\u00f3logos moleculares y los bioqu\u00edmicos que usan c\u00e9lulas HeLa para estudiar procesos celulares universales como la replicaci\u00f3n del ADN o el tr\u00e1fico de ves\u00edculas tienen menos probabilidades de preocuparse de que sus resultados no sean reproducibles, porque es poco probable que estos procesos cambien frente a tales presiones selectivas. Los bi\u00f3logos celulares y del desarrollo que estudian rasgos m\u00e1s complejos, como la infecci\u00f3n por Salmonella<\/em>, podr\u00edan tener m\u00e1s motivos para preocuparse.<\/p>\n Aebersold y sus colegas proponen varias soluciones espec\u00edficas en su art\u00edculo. Por un lado, los investigadores deben usar pasajes tempranos de l\u00edneas celulares de c\u00e1ncer y asegurarse de repetir los experimentos de una l\u00ednea celular en diferentes muestras de la misma l\u00ednea celular. Es importante destacar que los bi\u00f3logos deben informar claramente qu\u00e9 variantes de l\u00edneas celulares est\u00e1n utilizando en un estudio determinado. Mucha gente ni siquiera est\u00e1 segura de qu\u00e9 tipo de c\u00e9lulas HeLa tienen, se\u00f1ala Stearns, quien est\u00e1 de acuerdo en que una mayor transparencia ser\u00eda un cambio positivo.<\/p>\n Aebersold espera identificar m\u00e1s soluciones en un taller que est\u00e1 planeando m\u00e1s adelante este a\u00f1o con la Organizaci\u00f3n Europea de Biolog\u00eda Molecular. Esto incluir\u00e1 a 25 expertos de varios campos, como pol\u00edtica cient\u00edfica, publicaci\u00f3n y ciencia, para presentar recomendaciones sobre c\u00f3mo abordar los problemas de reproducibilidad en la investigaci\u00f3n de l\u00edneas celulares.<\/p>\n En \u00faltima instancia, espera que su trabajo ayudar a iluminar la pol\u00edtica cient\u00edfica sobre las causas de los resultados irreproducibles en la investigaci\u00f3n cient\u00edfica. La noci\u00f3n de que los cient\u00edficos no pueden replicar el trabajo de otros es peligrosa, dice. La conclusi\u00f3n simplista es que no sabemos lo que estamos haciendo como cient\u00edficos de la vida o, peor a\u00fan, que las cosas est\u00e1n inventadas. Esto facilitar\u00eda que los pol\u00edticos reacios a la ciencia argumentaran que el dinero gastado en investigaci\u00f3n se desperdicia. Creo que es importante proporcionar evidencia de que no es tan simple, la gente no solo hace trampa, la gente no es incompetente, sino que es m\u00e1s complicado.<\/p>\n Recibe acceso completo a m\u00e1s de 35 a\u00f1os de archivos<\/strong>, as\u00ed como a TS Digest<\/em><\/strong>, ediciones digitales de The Scientist<\/em><\/strong>, art\u00edculos destacados<\/strong> y mucho m\u00e1s. \u00danase gratis today\u00bfYa eres miembro?Iniciar sesi\u00f3n aqu\u00ed<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" ARRIBA: © ISTOCK.COM, HEITIPAVES Las c\u00e9lulas HeLa se han cultivado durante casi 70 a\u00f1os en muchos laboratorios de todo el mundo y durante mucho tiempo se consider\u00f3 que eran un suministro infinito de c\u00e9lulas id\u00e9nticas e inmutables. 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