ARRIBA: ISTOCK, ANUSORN NAKDEE<\/p>\n
La capacidad de los anticuerpos de investigaci\u00f3n para unirse a sus prote\u00ednas de inter\u00e9s, o a las etiquetas pept\u00eddicas adheridas a dichas prote\u00ednas, puede variar seg\u00fan sobre los amino\u00e1cidos particulares que rodean los sitios de uni\u00f3n objetivo o modificaciones a esos sitios, seg\u00fan informes publicados el martes (28 de enero) en Science<\/em> <\/em>Se\u00f1alizaci\u00f3n<\/em>. En algunos casos, tales anticuerpos incluso reaccionan de forma cruzada con otras prote\u00ednas, advierten los autores.<\/p>\n Estos documentos, como otros, indican claramente que incluso los anticuerpos disponibles comercialmente necesitan evaluaciones exhaustivas para los prop\u00f3sitos respectivos para los que ser\u00e1n utilizado, el farmac\u00f3logo Thomas Wieland de la Universidad de Heidelberg, que no particip\u00f3 en los art\u00edculos, escribe en un correo electr\u00f3nico a The Scientist<\/em><\/p>\n Anticuerpos, prote\u00ednas que se unen con alta afinidad y especificidad a las mol\u00e9culas diana , son una de las herramientas m\u00e1s utilizadas para estudiar la biolog\u00eda de las prote\u00ednas. Algunos se han producido para reconocer prote\u00ednas particulares de inter\u00e9s, mientras que otros reconocen cadenas pept\u00eddicas cortas (etiquetas) que se fusionan con prote\u00ednas para permitir la detecci\u00f3n o el aislamiento.<\/p>\n Pero estos anticuerpos no siempre se unen como se esperaba, ya que un n\u00famero de art\u00edculos recientes han destacado. A\u00fan as\u00ed, el problema sigue apareciendo porque las personas no siguen las instrucciones para la validaci\u00f3n, dice el pat\u00f3logo David Rimm de la Facultad de Medicina de Yale, que no form\u00f3 parte del equipo de investigaci\u00f3n. [Los investigadores] no se lo toman lo suficientemente en serio, dice, y explica que todav\u00eda hay datos de experimentos con anticuerpos no validados publicados en la literatura.<\/p>\n La gente necesita saber el peligro asociado al uso de anticuerpos, y si no quiere que sus anticuerpos lo enga\u00f1en, debe validarlos.<\/p>\n Egon Ogris, Universidad M\u00e9dica de Viena<\/p><\/blockquote>\n Egon Ogris de la Universidad M\u00e9dica de Viena, quien dirigi\u00f3 los dos nuevos estudios, est\u00e1 igualmente frustrado, y despu\u00e9s de que se preocup\u00f3 por un anticuerpo comercial espec\u00edfico que se usa com\u00fanmente, se sinti\u00f3 obligado a examinar el problema con m\u00e1s profundidad, como un servicio a la comunidad, dice.<\/p>\n Ogris estudia la prote\u00edna fosfatasa 2 (PP2A), una enzima de m\u00faltiples subunidades expresada de forma ubicua implicada en numerosas funciones celulares e implicada en enfermedades como el c\u00e1ncer y la neurodegeneraci\u00f3n. Para examinar una subunidad particular de la enzima, \u00e9l y un compa\u00f1ero de trabajo agregaron a la subunidad la etiqueta de p\u00e9ptido Myc com\u00fanmente utilizada. Pero, debido a que usaron diferentes enzimas para insertar las etiquetas, obtuvieron dos versiones de la subunidad etiquetada que difer\u00edan en solo unos pocos amino\u00e1cidos en la regi\u00f3n que une la etiqueta con la prote\u00edna, explica Ogris.<\/p>\n Cuando los investigadores utilizaron un anticuerpo dirigido a Myc disponible comercialmente llamado 9E10 para detectar las dos subunidades PP2A etiquetadas sutilmente diferentes, una versi\u00f3n de la prote\u00edna produjo una se\u00f1al clara y agradable, dice Ogris, y la otra apenas era visible.<\/p>\n La \u00fanica diferencia fueron estos cuatro o cinco amino\u00e1cidos, dice Ogris, lo que sugiere que esta fue la causa de que 9E10 no reconociera la etiqueta. Para investigar, su equipo produjo su propio anticuerpo Myc, el 4A6 ahora disponible comercialmente, y demostr\u00f3 que, a diferencia del 9E10, este reactivo pod\u00eda unirse igualmente bien a ambas etiquetas y producir se\u00f1ales de fuerza similares en ambas muestras. El equipo pas\u00f3 a examinar otros cuatro anticuerpos Myc disponibles comercialmente y descubri\u00f3 que todos menos uno exhib\u00edan una afinidad de uni\u00f3n variable por la etiqueta Myc dependiendo de las secuencias de amino\u00e1cidos circundantes.<\/p>\n Los hallazgos indican que c\u00f3mo y d\u00f3nde un investigador adjunta una etiqueta Myc a una prote\u00edna podr\u00eda influir en la detecci\u00f3n. El anticuerpo puede indicar una expresi\u00f3n alta o baja, aunque la prote\u00edna en realidad puede expresarse en niveles iguales, dice Ogris, lo que en realidad es una cat\u00e1strofe si lo piensas bien.<\/p>\n En su segundo estudio, Ogris y sus colegas examin\u00f3 los anticuerpos que se dirigen directamente a la subunidad catal\u00edtica de PP2A. Existen varios de estos anticuerpos, pero exist\u00eda la preocupaci\u00f3n de que la metilaci\u00f3n de la subunidad necesaria para que la enzima llevara a cabo su funci\u00f3n de eliminar grupos fosfato de ciertas mol\u00e9culas interfiriera con la capacidad de uni\u00f3n de los anticuerpos. De los cuatro anticuerpos probados por el equipo, todos menos uno mostraron una afinidad dr\u00e1sticamente reducida por la versi\u00f3n metilada de la prote\u00edna. Lo que es m\u00e1s alarmante, los mismos tres anticuerpos mostraron una afinidad d\u00e9bil por la fosfatasa PP4 relacionada pero completamente separada.<\/p>\n Todos los anticuerpos probados est\u00e1n disponibles comercialmente y uno (1D6) forma parte de un kit de ensayo de actividad PP2A ampliamente utilizado. Debido a sus hallazgos, Ogris aconseja a otros investigadores de PP2A que no utilicen el kit.<\/p>\n Rimm expres\u00f3 su preocupaci\u00f3n acerca de los cient\u00edficos que esperan que las empresas que venden los anticuerpos realicen la validaci\u00f3n por ellos. En \u00faltima instancia, la motivaci\u00f3n del proveedor [es] . . . aumentar el valor de los accionistas. Por lo tanto, no siempre les conviene hacer validaciones en\u00e9rgicas, dice. Por el contrario, la motivaci\u00f3n del cient\u00edfico es hacer ciencia, y si queremos hacer buena ciencia tenemos que estar seguros de que todos nuestros reactivos nos est\u00e1n dando los valores esperados y son reproducibles.<\/p>\n En definitiva, la gente necesita saber el peligro asociado al uso de anticuerpos, dice Ogris, y si no quiere ser enga\u00f1ado [por sus anticuerpos] . . . entonces debe validarlos.<\/p>\n Para obtener una gu\u00eda sobre c\u00f3mo validar sus propios anticuerpos, comerciales o de otro tipo, consulte aqu\u00ed.<\/p>\n S. Schuchner et al., El anticuerpo monoclonal 9E10 de etiqueta Myc muestra un reconocimiento de ep\u00edtopos muy variable que depende del contexto de la secuencia vecina, Sci. Signal.<\/em>, 13, eaax9730, 2020.<\/strong><\/p>\n IE Frohner et al., Los anticuerpos que reconocen el extremo C terminal de la subunidad catal\u00edtica de PP2A no son adecuados para evaluar la actividad de PP2A y la holoenzima composici\u00f3n, Sci. Signal.<\/em>, 13, eaax6490, 2020.<\/strong><\/p>\n Ruth Williams es una periodista independiente que vive en Connecticut. Env\u00edele un correo electr\u00f3nico a <\/em>ruth@wordsbyruth.com<\/em> o encu\u00e9ntrela en Twitter @rooph.<\/em><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" ARRIBA: ISTOCK, ANUSORN NAKDEE La capacidad de los anticuerpos de investigaci\u00f3n para unirse a sus prote\u00ednas de inter\u00e9s, o a las etiquetas pept\u00eddicas adheridas a dichas prote\u00ednas, puede variar seg\u00fan sobre los amino\u00e1cidos particulares que rodean los sitios de uni\u00f3n objetivo o modificaciones a esos sitios, seg\u00fan informes publicados el martes (28 de enero) en … Continuar leyendo \u00abLos anticuerpos defectuosos socavan la investigaci\u00f3n generalizada\u00bb<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"","ping_status":"","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[1],"tags":[],"class_list":["post-36514","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-general"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/36514","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=36514"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/36514\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=36514"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=36514"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=36514"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}\n