Cr\u00e9dito: CC0 Public Domain <\/p>\n
Las c\u00e9lulas T CD4+ son partes importantes del sistema inmunitario y desempe\u00f1an un papel clave en la defensa del cuerpo contra los pat\u00f3genos. Como poseen una gran variedad de mecanismos de defensa contra el VIH en su estado de reposo, se infectan muy raramente, pero estas pocas c\u00e9lulas infectadas forman un reservorio latente de VIH en el cuerpo que actualmente no puede ser alcanzado por los medicamentos antivirales. En consecuencia, el virus puede propagarse nuevamente desde all\u00ed despu\u00e9s de la activaci\u00f3n de las c\u00e9lulas T CD4+. Comprender c\u00f3mo interact\u00faa el VIH con las c\u00e9lulas T CD4+ en reposo es esencial para encontrar nuevos enfoques terap\u00e9uticos. Los cient\u00edficos dirigidos por el Prof. Oliver T. Keppler del Instituto Max von Pettenkofer en LMU ahora han desarrollado un m\u00e9todo que por primera vez permite manipular gen\u00e9ticamente estas c\u00e9lulas inmunitarias espec\u00edficas en condiciones fisiol\u00f3gicas de manera eficiente y sin complicaciones. Como informan los autores en la revista Nature Methods, esto permite obtener informaci\u00f3n sobre la biolog\u00eda de estas c\u00e9lulas que antes no se pod\u00eda obtener. <\/p>\n
Los linfocitos T CD4+ en reposo apenas hab\u00edan sido susceptibles de manipulaciones gen\u00e9ticas, porque los m\u00e9todos disponibles generalmente presuponen la divisi\u00f3n de las c\u00e9lulas, como explica Keppler. \u00abY las c\u00e9lulas en reposo no se dividen por definici\u00f3n\u00bb. Como primer paso en el desarrollo del nuevo m\u00e9todo, el equipo de cient\u00edficos optimiz\u00f3 las condiciones de cultivo. Como resultado, los investigadores pudieron mantener vivas estas c\u00e9lulas en el laboratorio despu\u00e9s de extraerlas de la sangre de donantes sanos no solo durante 3 o 4 d\u00edas como antes, sino hasta seis semanas. El progreso decisivo se produjo con un avance en la nucleofecci\u00f3n, un m\u00e9todo especial que permite administrar reactivos en el n\u00facleo de una c\u00e9lula. Utilizando esta t\u00e9cnica, los investigadores introdujeron las tijeras gen\u00e9ticas CRISPR-Cas en c\u00e9lulas T CD4+ en reposo, lo que les permiti\u00f3 realizar modificaciones espec\u00edficas en el genoma de las c\u00e9lulas hu\u00e9sped, por ejemplo, mediante la eliminaci\u00f3n de genes mediante los llamados knockouts. \u00abEsta combinaci\u00f3n funcion\u00f3 de manera muy eficiente y pudimos alcanzar y manipular gen\u00e9ticamente alrededor del 98 por ciento de las c\u00e9lulas. Adem\u00e1s, lo hicimos sin activar las c\u00e9lulas T CD4+\u00bb, dice Keppler. \u00abLo que fue particularmente emocionante fue que pudimos eliminar hasta seis genes simult\u00e1neamente con alta eficiencia por medio de una sola nucleofecci\u00f3n. Nadie hab\u00eda logrado hacer eso en c\u00e9lulas primarias antes y lo hicimos con c\u00e9lulas aisladas de un \u00f3rgano intacto\u00bb. \/p> <\/p>\n
Gen knock-out y knock-in<\/p>\n
En el futuro, los investigadores podr\u00e1n eliminar genes individuales y v\u00edas de se\u00f1alizaci\u00f3n completas y analizar sus funciones. Al eliminar los genes correspondientes, ya lograron aclarar si cuatro factores celulares previamente controvertidos juegan un papel en la infecci\u00f3n por el VIH o no.<\/p>\n
Adem\u00e1s de esto, buscaron una segunda \u00abknock-in\u00bb enfoque, mediante el cual se insertan genes adicionales o ligeramente modificados, como un gen para la prote\u00edna fluorescente verde (GFP). Con la ayuda de esta prote\u00edna, los investigadores pueden analizar c\u00f3mo cambia la actividad de un gen objetivo bajo ciertas condiciones, o pueden marcar prote\u00ednas espec\u00edficas. \u00abTodas estas cosas juntas nos dan la oportunidad por primera vez de investigar la interacci\u00f3n del VIH con las c\u00e9lulas T CD4+ humanas en reposo en condiciones fisiol\u00f3gicas\u00bb, explica Adrian Ruhle, coautor principal del estudio. \u00abPero tambi\u00e9n podemos investigar mejor estas c\u00e9lulas en su funci\u00f3n general como c\u00e9lulas inmunitarias m\u00e1s all\u00e1 del VIH\u00bb. A largo plazo, los investigadores esperan que tener una mejor comprensi\u00f3n de la biolog\u00eda de estas c\u00e9lulas conduzca a nuevos enfoques para la eliminaci\u00f3n total del VIH del cuerpo de los pacientes, ya que todav\u00eda hay alrededor de 37 millones de personas en todo el mundo infectadas con el virus. <\/p>\n
Explore m\u00e1s<\/p>\n
Biolog\u00eda molecular: \u00bfson epigen\u00e9ticamente maleables las c\u00e9lulas que proliferan r\u00e1pidamente? M\u00e1s informaci\u00f3n:<\/strong> Manuel Albanese et al, La edici\u00f3n g\u00e9nica r\u00e1pida, eficiente y de activaci\u00f3n neutral de c\u00e9lulas T CD4+ en reposo humanas primarias policlonales permite an\u00e1lisis funcionales complejos, Nature Methods (2021). DOI: 10.1038\/s41592-021-01328-8 Informaci\u00f3n de la revista:<\/strong> Nature Methods <\/p>\n Proporcionado por la Universidad Ludwig Maximilian de Munich Cita<\/strong>: Nuevo m\u00e9todo para el an\u00e1lisis gen\u00e9tico de animales en reposo c\u00e9lulas inmunes humanas (28 de diciembre de 2021) recuperado el 29 de agosto de 2022 de https:\/\/medicalxpress.com\/news\/2021-12-method-genetic-analysis-resting-human.html Este documento est\u00e1 sujeto a derechos de autor. Aparte de cualquier trato justo con fines de estudio o investigaci\u00f3n privados, ninguna parte puede reproducirse sin el permiso por escrito. El contenido se proporciona \u00fanicamente con fines informativos.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Cr\u00e9dito: CC0 Public Domain Las c\u00e9lulas T CD4+ son partes importantes del sistema inmunitario y desempe\u00f1an un papel clave en la defensa del cuerpo contra los pat\u00f3genos. Como poseen una gran variedad de mecanismos de defensa contra el VIH en su estado de reposo, se infectan muy raramente, pero estas pocas c\u00e9lulas infectadas forman un … Continuar leyendo \u00abNuevo m\u00e9todo para el an\u00e1lisis gen\u00e9tico de c\u00e9lulas inmunitarias humanas en reposo\u00bb<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"","ping_status":"","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[1],"tags":[],"class_list":["post-3736","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-general"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3736","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=3736"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/3736\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3736"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=3736"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=3736"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}