La investigadora del NIST, Megan Cleveland, usa una m\u00e1quina de PCR para amplificar secuencias de ADN copi\u00e1ndolas varias veces a trav\u00e9s de una serie de reacciones qu\u00edmicas. Cr\u00e9dito: M. Cleveland\/NIST <\/p>\n
Los cient\u00edficos rastrean y monitorean la circulaci\u00f3n del SARS-CoV-2, el virus que causa el COVID-19, utilizando m\u00e9todos basados en una t\u00e9cnica de laboratorio llamada reacci\u00f3n en cadena de la polimerasa (PCR). Tambi\u00e9n utilizada como la prueba \u00abest\u00e1ndar de oro\u00bb para diagnosticar COVID-19 en individuos, la PCR amplifica fragmentos de ADN copi\u00e1ndolos numerosas veces a trav\u00e9s de una serie de reacciones qu\u00edmicas. La cantidad de ciclos necesarios para amplificar las secuencias de ADN de inter\u00e9s para que sean detectables por la m\u00e1quina de PCR, conocida como umbral de ciclo (Ct), es lo que los investigadores y profesionales m\u00e9dicos observan para detectar el virus. <\/p>\n
Sin embargo, no todos los laboratorios obtienen los mismos valores Ct (a veces tambi\u00e9n llamados valores \u00abCq\u00bb). En un esfuerzo por hacer que los resultados sean m\u00e1s comparables entre laboratorios, el Instituto Nacional de Est\u00e1ndares y Tecnolog\u00eda (NIST, por sus siglas en ingl\u00e9s) contribuy\u00f3 a un estudio multiorganizacional que buscaba anclar estos valores de Ct a una muestra de referencia con cantidades conocidas del virus.<\/p>\n
Los investigadores publicaron sus hallazgos en la revista PLOS One.<\/p>\n
El SARS-CoV-2 es un virus de ARN: su material gen\u00e9tico es monocatenario en lugar de bicatenario como el ADN y contiene algunos componentes moleculares diferentes, a saber, uracilo en lugar de timina. Pero la prueba de PCR solo funciona con ADN, y los laboratorios primero deben convertir el ARN en ADN para detectar COVID-19. Para la prueba, el ARN se a\u00edsla de la muestra de un paciente y se combina con otros ingredientes, incluidas secuencias cortas de ADN conocidas como cebadores, para transformar el ARN en ADN. <\/p>\n
Al realizar una prueba de PCR, los laboratorios a menudo usan el valor Ct para hacer un diagn\u00f3stico positivo o negativo de COVID-19. Los laboratorios a menudo establecen un valor Ct de \u00abcorte\u00bb por encima del cual interpretan y pueden declarar a un paciente \u00abnegativo\u00bb si el virus no se detecta despu\u00e9s de una cierta cantidad de ciclos. Pero a pesar de que diferentes laboratorios pueden detectar con precisi\u00f3n el virus usando sus pruebas de PCR, usan sus propios m\u00e9todos e instrumentos de prueba, lo que podr\u00eda conducir a diferentes valores de Ct.<\/p>\n
\u00abPuede pensar en ello como hornear galletas en mismo horno, de la misma receta, las galletas que horneas durante 10 minutos probablemente ser\u00e1n m\u00e1s blandas que las galletas horneadas durante 15 minutos, pero si algo en la receta fuera diferente, si el horno no tuviera la misma temperatura, si usaras un tipo diferente de bandeja para hornear, por ejemplo, entonces podr\u00eda no ser tan comparable\u00bb, dijo Megan Cleveland, investigadora del NIST y coautora del estudio.<\/p>\n
Entonces, para este estudio, un equipo de investigaci\u00f3n multiorganizacional se dispuso a explorar cu\u00e1nto podr\u00edan variar los valores de Ct entre diferentes laboratorios cuando realizaron pruebas de PCR en las mismas muestras de referencia que conten\u00edan cantidades conocidas del virus SARS-CoV-2. Un grupo de organizaciones e instituciones dirigidas por INSTAND, una sociedad cient\u00edfica interdisciplinaria de Alemania que promueve la garant\u00eda de calidad en los laboratorios m\u00e9dicos, desarroll\u00f3 dos materiales de referencia con concentraciones cuidadosamente medidas del ARN del SARS-CoV-2. El RM 1 ten\u00eda una carga viral estimada de 10 millones (107) de copias por mililitro y el RM 2 ten\u00eda una carga viral estimada de un mill\u00f3n (106 ) de copias por mililitro.<\/p>\n
Para garantizar que estos valores fueran precisos, tres Los institutos nacionales de metrolog\u00eda, el Laboratorio Nacional de Medici\u00f3n Qu\u00edmica y Biomedida (LGC) del Reino Unido, Physikalisch-Technische Bundesanstalt (PTB, en Alemania) y el NIST, midieron y validaron los materiales de referencia mediante PCR digital. La PCR digital sigue los mismos pasos que la PCR tradicional pero es una versi\u00f3n m\u00e1s avanzada. En la PCR digital, la muestra se divide en miles de peque\u00f1as gotas. Tambi\u00e9n se agrega un compuesto para que, cuando se detecta el ADN objetivo, emita un brillo, lo que permite a los investigadores confirmar si la muestra es positiva para el coronavirus con la presencia de mol\u00e9culas fluorescentes.<\/p>\n
Los materiales de referencia fueron enviados a un total de 305 laboratorios en Alemania, que arrojaron 1.109 conjuntos de datos para ser analizados. Los valores de Ct difer\u00edan entre laboratorios seg\u00fan el sistema de prueba o el equipo de PCR utilizado y las secuencias de ADN objetivo del virus. Por ejemplo, los ensayos de PCR destinados a detectar un gen clave (el gen \u00abN\u00bb) en el virus COVID-19 ten\u00edan un rango de valores de Ct entre 17,6 y 26,9 para RM 1, mientras que para RM 2 el rango estaba entre 20,7 y 30,1. Los rangos entre los dos RM se superponen (20,7 a 26,9) a pesar de que tienen diferentes concentraciones de carga viral, lo que demuestra que no es posible determinar la concentraci\u00f3n precisa solo a partir de los valores de Ct, dijo Cleveland.<\/p>\n
Las diferencias en Ct Los valores entre laboratorios mostraron la utilidad de los materiales de referencia como una herramienta para ayudar a los laboratorios a comparar y estandarizar sus resultados.<\/p>\n
Algunos han visto previamente el valor Ct como una forma de medir la carga viral, la cantidad de virus en un cuerpo de la persona Pero la variaci\u00f3n en los valores de Ct entre laboratorios subraya que las dos variables simplemente est\u00e1n correlacionadas entre s\u00ed. Por ejemplo, si un individuo tiene una carga viral m\u00e1s alta, entonces su valor de Ct ser\u00eda bajo porque se necesitar\u00edan menos ciclos para amplificar el material gen\u00e9tico del virus.<\/p>\n
\u00abUn valor de Ct m\u00e1s bajo significa m\u00e1s ADN con el coronavirus comenzando en la muestra. Se correlaciona con la carga viral. Pero el Ct puede variar seg\u00fan el material de extracci\u00f3n o el m\u00e9todo utilizado. Todas estas cosas pueden afectar el punto en el que se detecta el ADN\u00bb, dijo Cleveland.<\/p>\n
Sin embargo, mediante el uso de los materiales de referencia apropiados, los valores de Ct pueden convertirse potencialmente en un valor real de concentraci\u00f3n de virus en copias por microlitro, lo que ser\u00eda una forma de cuantificar la carga viral, aunque este no fue el enfoque del estudio. dijo Peter Vallone, investigador y coautor del NIST.<\/p>\n
Algunos tambi\u00e9n han sugerido usar los valores de Ct para determinar qu\u00e9 tan infeccioso es un paciente, otra pr\u00e1ctica contra la cual Cleveland advierte. \u201cHay quienes en el campo intentan decir, por ejemplo, que un valor de Ct superior a 30 significa que una persona tiene COVID, pero no es suficiente para propagar la infecci\u00f3n a otra persona. Pero realmente no sabes de qu\u00e9 lado est\u00e1s. infeccioso o no, con ese valor\u00bb, dijo Cleveland.<\/p>\n
Aunque los valores de Ct por s\u00ed solos no determinan qu\u00e9 tan enfermo o infectado est\u00e1 un individuo, comprender estos valores podr\u00eda ayudar a informar las decisiones sobre el establecimiento de criterios para monitorear a las personas afectadas por el coronavirus. Y los materiales de referencia de ARN pueden ayudar a que estos resultados sean m\u00e1s confiables y comparables.<\/p>\n
\u00abLas personas deben usar materiales de referencia bien caracterizados junto con sus m\u00e9todos de prueba en lugar de confiar solo en los valores de Ct. Por s\u00ed solo, el Ct los valores no son f\u00e1cilmente comparables entre laboratorios de pruebas, pero es beneficioso que los investigadores tengan acceso a materiales de referencia y comprendan su importancia\u00bb, dijo Cleveland. <\/p>\n
Explore m\u00e1s<\/p>\n
Medici\u00f3n de la sensibilidad de las pruebas de COVID con nuevo material del NIST M\u00e1s informaci\u00f3n:<\/strong> Laura Vierbaum et al, materiales de referencia de ARN con cargas definidas de ARN viral de SARS-CoV-2A \u00fatil herramienta hacia una mejor armonizaci\u00f3n de ensayos de PCR, PLOS ONE (2022). DOI: 10.1371\/journal.pone.0262656 Informaci\u00f3n de la revista:<\/strong> PLoS ONE <\/p>\n Proporcionado por el Instituto Nacional de Est\u00e1ndares y Tecnolog\u00eda Cita<\/strong>: Los materiales de referencia de ARN son \u00fatiles para estandarizar COVID -19 pruebas, programas de estudio (2022, 20 de enero) recuperado el 29 de agosto de 2022 de https:\/\/medicalxpress.com\/news\/2022-01-rna-materials-standardizing-covid-.html Este documento est\u00e1 sujeto a derechos de autor. Aparte de cualquier trato justo con fines de estudio o investigaci\u00f3n privados, ninguna parte puede reproducirse sin el permiso por escrito. El contenido se proporciona \u00fanicamente con fines informativos.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" La investigadora del NIST, Megan Cleveland, usa una m\u00e1quina de PCR para amplificar secuencias de ADN copi\u00e1ndolas varias veces a trav\u00e9s de una serie de reacciones qu\u00edmicas. Cr\u00e9dito: M. Cleveland\/NIST Los cient\u00edficos rastrean y monitorean la circulaci\u00f3n del SARS-CoV-2, el virus que causa el COVID-19, utilizando m\u00e9todos basados en una t\u00e9cnica de laboratorio llamada reacci\u00f3n … Continuar leyendo \u00abLos materiales de referencia de ARN son \u00fatiles para estandarizar las pruebas de COVID-19, muestra un estudio\u00bb<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"","ping_status":"","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[1],"tags":[],"class_list":["post-6396","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-general"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/6396","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=6396"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/6396\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=6396"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=6396"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=6396"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}