Demostraci\u00f3n de la sensibilidad, selectividad y repetibilidad de los ensayos SuperSelective PCR que contienen fragmentos de ADN de 10 000 copias de ADN gen\u00f3mico humano, en las que la actina sirve como gen de referencia de tipo salvaje ( azul), y que adem\u00e1s contienen los siguientes fragmentos de ADN: 1.000 mutaciones puntuales EGFR T790M (verde); 100 mutaciones por deleci\u00f3n de EGFR E745-A750 (rojo); 10 mutaciones puntuales de EGFR G719C (naranja); y sin mutaciones puntuales de EGFR L858R (gris). Cr\u00e9dito: Journal of Molecular Diagnostics <\/p>\n
Usando una muestra de sangre de rutina, los investigadores han desarrollado un ensayo extremadamente sensible para detectar y cuantificar fragmentos de ADN que contienen mutaciones gen\u00e9ticas raras en las c\u00e9lulas cancerosas de un paciente. Este ensayo utiliza cebadores de PCR \u00absuperselectivos\u00bb que pr\u00e1cticamente ignoran abundantes fragmentos de ADN no mutantes estrechamente relacionados derivados de las c\u00e9lulas normales de los pacientes. Este nuevo ensayo es m\u00e1s r\u00e1pido y considerablemente m\u00e1s econ\u00f3mico que los m\u00e9todos actuales y se puede realizar con instrumentos ampliamente disponibles. Los investigadores demuestran la facilidad de utilidad de este enfoque en un nuevo informe en el Journal of Molecular Diagnostics. <\/p>\n
\u00abEl objetivo a largo plazo de esta investigaci\u00f3n es desarrollar ensayos altamente multiplexados que permitan tanto la detecci\u00f3n temprana de mutaciones relevantes para el c\u00e1ncer antes de que se presenten s\u00edntomas como la aplicaci\u00f3n de un tratamiento temprano eficaz. Estos ensayos utilizar\u00e1n biopsias l\u00edquidas no invasivas (muestras de sangre de rutina) tomadas durante el chequeo m\u00e9dico anual de una persona, y los fragmentos de ADN presentes transitoriamente en la muestra de sangre (que se originan de c\u00e9lulas que han muerto) luego se analizar\u00e1n mediante t\u00e9cnicas de PCR digitales o en tiempo real altamente multiplexadas\u00bb, explicaron los investigadores principales. Diana Yaneth Vargas, MS, y Fred Russell Kramer, Ph.D., del Public Health Research Institute of the New Jersey Medical School of Rutgers University, Newark, NJ, EE. UU.<\/p>\n
T\u00e9cnicas actuales para analizar biopsias l\u00edquidas involucrar el an\u00e1lisis de secuencias de pr\u00f3xima generaci\u00f3n, que es costoso, largo y tiene una sensibilidad limitada; o utilice una t\u00e9cnica de PCR en la que se amplifican tanto los fragmentos de ADN mutantes como los fragmentos de ADN de tipo salvaje estrechamente relacionados, lo que limita la sensibilidad cuando los fragmentos de ADN mutantes son escasos. El dise\u00f1o \u00fanico de los cebadores SuperSelective PCR, por otro lado, permite la amplificaci\u00f3n de los fragmentos de ADN mutantes, al mismo tiempo que previene de manera efectiva la amplificaci\u00f3n de los abundantes fragmentos de ADN de tipo salvaje estrechamente relacionados. En consecuencia, los ensayos de PCR SuperSelective descritos en este informe son muy sensibles.<\/p>\n
Los ensayos de PCR SuperSelective Multiplex, que utilizan biopsias l\u00edquidas no invasivas frecuentes, permiten elegir y modificar posteriormente una terapia dirigida eficaz para el tratamiento de una c\u00e1ncer del individuo. Adem\u00e1s, despu\u00e9s del tratamiento, estos ensayos pueden ayudar a monitorear al paciente para detectar la presencia de enfermedad residual m\u00ednima, lo que permite una intervenci\u00f3n adicional si es necesario.<\/p>\n
Para demostrar el potencial cl\u00ednico de su enfoque, seis muestras de ADN del plasma de Se ensayaron pacientes con c\u00e1ncer. Las muestras de cinco de los pacientes fueron cegadas. Se realizaron ensayos de PCR SuperSelective Multiplex para confirmar la presencia o ausencia de mutaciones espec\u00edficas del receptor del factor de crecimiento epid\u00e9rmico humano (EGFR) en cada muestra. Se eligieron estas mutaciones porque su presencia determina qu\u00e9 terapia dirigida tiene m\u00e1s probabilidades de ser eficaz contra el c\u00e1ncer de pulm\u00f3n de c\u00e9lulas no peque\u00f1as. Cuatro muestras dieron positivo para diferentes mutaciones diana de EGFR y dos muestras no dieron se\u00f1ales de mutaciones diana de EGFR. Despu\u00e9s de que se desenmascararon las muestras ciegas, se revel\u00f3 que las dos muestras negativas eran de pacientes que no ten\u00edan mutaciones de EGFR, y esas muestras se proporcionaron deliberadamente como control. Los ensayos identificaron las mutaciones previamente conocidas en las otras muestras. Significativamente, el ensayo tambi\u00e9n identific\u00f3 una mutaci\u00f3n de resistencia muy rara en una muestra ciega que no se sab\u00eda previamente que estaba presente, lo que sugiere que era necesario cambiar la terapia dirigida del paciente.<\/p>\n
\u00abLa \u00fanica diferencia entre estos ensayos y La PCR en tiempo real m\u00faltiplex convencional es la sustituci\u00f3n de cebadores SuperSelective por cebadores convencionales\u00bb, dijeron los investigadores. \u00abEstos ensayos se pueden realizar r\u00e1pidamente en los puntos de atenci\u00f3n y los resultados se pueden usar de inmediato para informar las decisiones cl\u00ednicas posteriores\u00bb.<\/p>\n
Los autores se\u00f1alan que esta tecnolog\u00eda podr\u00eda tener otras aplicaciones m\u00e9dicas, como la identificaci\u00f3n de bacterias raras resistentes a los antibi\u00f3ticos y la identificaci\u00f3n de genes mutantes raros que se encuentran en las c\u00e9lulas fetales que circulan en el plasma de una madre. Por lo tanto, es probable que la disponibilidad de ensayos de PCR SuperSelective multiplex sensibles tenga una amplia utilidad cl\u00ednica\u00bb. <\/p>\n
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Nueva prueba personalizada para una predicci\u00f3n m\u00e1s temprana y precisa de la reca\u00edda del c\u00e1ncer en ni\u00f1os con LLA M\u00e1s informaci\u00f3n :<\/strong> Diana Y. Vargas et al, Ensayos de PCR superselectiva m\u00faltiplex para la detecci\u00f3n y cuantificaci\u00f3n de mutaciones som\u00e1ticas raras en biopsias l\u00edquidas, The Journal of Molecular Diagnostics (2021). DOI: 10.1016\/j.jmoldx.2021.11.006 Informaci\u00f3n de la revista:<\/strong> Journal of Molecular Diagnostics <\/p>\n Proporcionado por Elsevier Cita<\/strong>: Nuevo ensayo muestra promesa para avanzar en el tratamiento personalizado del c\u00e1ncer (2022, 11 de febrero) consultado el 29 de agosto de 2022 en https :\/\/medicalxpress.com\/news\/2022-02-assay-advancing-personalized-cancer-treatment.html Este documento est\u00e1 sujeto a derechos de autor. Adem\u00e1s de cualquier trato justo con fines de estudio o investigaci\u00f3n privados, ninguna parte puede ser reproducida. sin el permiso por escrito. El contenido se proporciona \u00fanicamente con fines informativos.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Demostraci\u00f3n de la sensibilidad, selectividad y repetibilidad de los ensayos SuperSelective PCR que contienen fragmentos de ADN de 10 000 copias de ADN gen\u00f3mico humano, en las que la actina sirve como gen de referencia de tipo salvaje ( azul), y que adem\u00e1s contienen los siguientes fragmentos de ADN: 1.000 mutaciones puntuales EGFR T790M (verde); … Continuar leyendo \u00abNuevo ensayo se muestra prometedor para avanzar en el tratamiento personalizado del c\u00e1ncer\u00bb<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"","ping_status":"","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[1],"tags":[],"class_list":["post-8585","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-general"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/8585","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=8585"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/8585\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=8585"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=8585"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=8585"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}