Las condiciones de transducci\u00f3n pueden mejorar la eficiencia de la transducci\u00f3n en las c\u00e9lulas T no activadas. a, Las c\u00e9lulas T humanas reci\u00e9n aisladas se privaron de suero mediante lavado y resuspensi\u00f3n en medio sin suero o se mantuvieron en medio completo durante 36 horas. Luego, las c\u00e9lulas se transdujeron con un vector lentiviral que codifica iRFP durante 24 horas en presencia de IL-7 e IL-15 en medio completo y se mantuvieron en cultivo durante 5 d\u00edas antes de determinar la frecuencia de c\u00e9lulas iRFP+. Cada punto representa la frecuencia de transducci\u00f3n, determinada por citometr\u00eda de flujo, de un experimento independiente con seis donantes diferentes. ***P=0,0002. b, cambio relativo en la transducci\u00f3n de c\u00e9lulas iRFP+ transducidas en presencia de 50 M dNs normalizadas a c\u00e9lulas iRFP+ transducidas en medio completo sin dNs. Los datos son los medios.d. de seis experimentos realizados con diferentes donantes. *P=0,0312. En a y b, se utiliz\u00f3 una prueba t pareada de dos colas. c, la transducci\u00f3n de c\u00e9lulas T con el vector lentiviral iRFP se realiz\u00f3 en uno (control; izquierda), dos (medio) o cuatro (derecha) pozos, con el volumen de cultivo total mantenido constante. A continuaci\u00f3n, las c\u00e9lulas se mantuvieron en cultivo durante 5 d\u00edas en medio que conten\u00eda IL-7 e IL-15 antes de determinar la frecuencia de c\u00e9lulas iRFP+ mediante citometr\u00eda de flujo. Los resultados son representativos de tres experimentos independientes que utilizan tres donantes diferentes. d, las c\u00e9lulas T humanas reci\u00e9n aisladas se transdujeron con un vector lentiviral que codifica iRFP en condiciones optimizadas como se describe en ac (privaci\u00f3n de suero, dNs y geometr\u00eda optimizada). Luego, las c\u00e9lulas T se mantuvieron en cultivo durante 5 d\u00edas, seguido de un an\u00e1lisis de citometr\u00eda de flujo para la expresi\u00f3n de iRFP. Los resultados son representativos de la mejor transducci\u00f3n lograda usando este proceso. c, d, se indican los porcentajes de c\u00e9lulas transducidas (cuadros rosas). e, Esquema de la generaci\u00f3n de c\u00e9lulas CART19 no activadas en 24h. f, Frecuencia de c\u00e9lulas CAR T, estimada por an\u00e1lisis qPCR del n\u00famero de copias del vector, en sangre perif\u00e9rica recolectada 3 semanas despu\u00e9s de la transferencia adoptiva de c\u00e9lulas T. Los resultados se expresan como porcentaje de c\u00e9lulas humanas por normalizaci\u00f3n al gen CDKN1A, que tiene dos copias en el genoma diploide humano. Cada s\u00edmbolo representa un donante separado. Cr\u00e9dito: Nature Biomedical Engineering (2022). DOI: 10.1038\/s41551-021-00842-6 <\/p>\n
Un nuevo enfoque de los investigadores de Penn Medicine podr\u00eda reducir el tiempo que lleva alterar las c\u00e9lulas inmunitarias de los pacientes para infundirlas nuevamente en el cuerpo para encontrar y atacar el c\u00e1ncer. El proceso de fabricaci\u00f3n de c\u00e9lulas para este tipo de inmunoterapia que fue pionero en la terapia de c\u00e9lulas T de PennCAR suele tardar entre 9 y 14 d\u00edas. En un estudio precl\u00ednico publicado en Nature Biomedical Engineering, un equipo de la Facultad de Medicina Perelman de la Universidad de Pensilvania acort\u00f3 este proceso y gener\u00f3 c\u00e9lulas CAR T funcionales con potencia antitumoral mejorada en solo 24 horas. <\/p>\n
Estos resultados demuestran el potencial de una gran reducci\u00f3n en el tiempo, los materiales y la mano de obra necesarios para generar c\u00e9lulas CAR T, lo que podr\u00eda ser especialmente beneficioso en pacientes con enfermedad r\u00e1pidamente progresiva y en entornos de atenci\u00f3n m\u00e9dica con pocos recursos. El estudio fue dirigido por los investigadores del Centro de Inmunoterapias Celulares Michael C. Milone, MD, Ph.D., profesor asociado de Patolog\u00eda y Medicina de Laboratorio y Saba Ghassemi, Ph.D., profesor asistente de investigaci\u00f3n de Patolog\u00eda y Medicina de Laboratorio.<\/p>\n
\u00abSi bien los enfoques de fabricaci\u00f3n tradicionales utilizados para crear c\u00e9lulas CAR T que demoran varios d\u00edas o semanas contin\u00faan funcionando para pacientes con c\u00e1nceres ‘l\u00edquidos’ como la leucemia, todav\u00eda existe una necesidad significativa de reducir el tiempo y el costo de produciendo estas terapias complejas\u00bb, dijo Milone. \u00abSobre la base de nuestra investigaci\u00f3n de 2018 que redujo el enfoque de fabricaci\u00f3n est\u00e1ndar a tres d\u00edas, y ahora a menos de 24 horas, el m\u00e9todo de fabricaci\u00f3n informado en este estudio es un testimonio del potencial para innovar y mejorar la producci\u00f3n de terapias con c\u00e9lulas CAR T para el beneficio de m\u00e1s pacientes\u00bb.<\/p>\n
La terapia con c\u00e9lulas CAR T es un tipo de inmunoterapia que se usa para combatir el c\u00e1ncer con las propias c\u00e9lulas inmunitarias alteradas del paciente. Las c\u00e9lulas T se extraen de la sangre de un paciente y se modifican en el laboratorio al agregar un gen para un receptor (llamado receptor de ant\u00edgeno quim\u00e9rico o CAR). Luego, las c\u00e9lulas CAR T se vuelven a infundir en un paciente para encontrar, unirse y destruir las c\u00e9lulas cancerosas. Sin embargo, cuando se eliminan demasiado tiempo del cuerpo durante el proceso de ingenier\u00eda, las c\u00e9lulas T pueden perder su capacidad de replicaci\u00f3n, lo cual es fundamental para su eficacia como medicamento vivo. Por lo tanto, el equipo de investigaci\u00f3n de Penn busc\u00f3 acortar el proceso sin sacrificar la potencia de las c\u00e9lulas T. <\/p>\n
En modelos animales, los investigadores aprendieron que la calidad, m\u00e1s que la cantidad, del producto de c\u00e9lulas CAR T es un determinante importante de su eficacia. Su experimento proporcion\u00f3 evidencia de que una cantidad m\u00e1s peque\u00f1a de c\u00e9lulas T con CAR de alta calidad que se generan sin una expansi\u00f3n extensa fuera del cuerpo es superior a una cantidad m\u00e1s alta de c\u00e9lulas T con CAR de calidad reducida que se expanden ampliamente antes de regresar al paciente.<\/p>\n
Los enfoques de fabricaci\u00f3n tradicionales requieren que las c\u00e9lulas T sean estimuladas (o \u00abactivadas\u00bb) de una manera que induzca a las c\u00e9lulas a replicarse y expandirse en n\u00famero. Una clave para el enfoque de fabricaci\u00f3n de los investigadores de Penn es el vector lentiviral que entrega el gen CAR a las c\u00e9lulas T. Los vectores lentivirales, que se derivan del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), pueden transferir genes como el CAR a las c\u00e9lulas sin necesidad de este paso inicial de \u00abactivaci\u00f3n\u00bb, pero la eficiencia de este proceso fue baja. Usando enfoques de ingenier\u00eda que se basaron en parte en el conocimiento de c\u00f3mo el VIH infecta naturalmente las c\u00e9lulas T, los investigadores de Penn desarrollaron una forma de superar este requisito para la activaci\u00f3n de las c\u00e9lulas T y entregar genes directamente a las c\u00e9lulas T no activadas reci\u00e9n aisladas de la sangre. Esto tuvo el doble beneficio de acelerar el proceso de fabricaci\u00f3n general y al mismo tiempo mantener la potencia de las c\u00e9lulas T. Los pacientes no se infectan con el VIH a trav\u00e9s de este proceso.<\/p>\n
El proceso de ingenier\u00eda de c\u00e9lulas T es costoso y requiere mucho tiempo, ya que el tratamiento debe fabricarse para cada paciente individual. El equipo espera que reducir el tiempo de fabricaci\u00f3n pueda hacer que la terapia sea m\u00e1s rentable y accesible para m\u00e1s pacientes.<\/p>\n
\u00abEste enfoque innovador es notable porque puede ayudar a los pacientes que de otro modo no podr\u00edan beneficiarse de la terapia con c\u00e9lulas CAR T, como aquellos con c\u00e1ncer que progresa r\u00e1pidamente, debido al tiempo significativo que actualmente se necesita para generar estas terapias\u00bb, dijo Ghassemi. \u00abLa reprogramaci\u00f3n eficiente de c\u00e9lulas T con un CAR en tan solo 24 horas en un proceso de fabricaci\u00f3n m\u00e1s simplificado sin activaci\u00f3n de c\u00e9lulas T o cultivo extensivo fuera del cuerpo tambi\u00e9n ofrece la posibilidad de expandir d\u00f3nde y cu\u00e1ndo se producen estas terapias. No solo podr\u00eda mejorar La capacidad de producci\u00f3n de las instalaciones de fabricaci\u00f3n centralizadas, pero si es lo suficientemente simple y consistente, podr\u00eda ser posible producir estas terapias localmente cerca del paciente, lo que podr\u00eda ser equivalente a abordar los muchos desaf\u00edos log\u00edsticos que impiden la entrega de esta terapia efectiva, especialmente en pa\u00edses con pocos recursos. ambientes\u00bb. <\/p>\n
Este estudio es un catalizador para m\u00e1s investigaci\u00f3n cl\u00ednica para investigar c\u00f3mo las c\u00e9lulas CAR T dise\u00f1adas, a trav\u00e9s de este enfoque abreviado, funcionan en pacientes con c\u00e1nceres espec\u00edficos.<\/p>\n
Los cient\u00edficos de Penn lideraron la investigaci\u00f3n, el desarrollo y ensayos cl\u00ednicos de esta terapia CAR T pionera en colaboraci\u00f3n con Novartis y el Children’s Hospital of Philadelphia. En 2017, la terapia experimental ahora conocida como Kymriah se convirti\u00f3 en la primera c\u00e9lula CAR T aprobada por la Administraci\u00f3n de Drogas y Alimentos de los EE. UU. (FDA) para el tratamiento de pacientes pedi\u00e1tricos y adultos j\u00f3venes con leucemia linfobl\u00e1stica aguda (LLA). La terapia tambi\u00e9n se aprob\u00f3 para ciertos tipos de linfoma en 2018. <\/p>\n
Explore m\u00e1s<\/p>\n
El estudio de remisiones de leucemia de una d\u00e9cada despu\u00e9s de que Car T revela nuevos detalles sobre la persistencia de c\u00e9lulas personalizadas M\u00e1s informaci\u00f3n:<\/strong> Saba Ghassemi et al, Fabricaci\u00f3n r\u00e1pida de c\u00e9lulas T CAR potentes no activadas, Nature Biomedical Engineering (2022). DOI: 10.1038\/s41551-021-00842-6 Informaci\u00f3n de la revista:<\/strong> Nature Biomedical Engineering <\/p>\n Proporcionado por la Escuela de Medicina Perelman de la Universidad de Pensilvania Cita<\/strong>: Los investigadores acortan tiempo de fabricaci\u00f3n para la terapia de c\u00e9lulas T con CAR (2022, 29 de marzo) recuperado el 29 de agosto de 2022 de https:\/\/medicalxpress.com\/news\/2022-03-shorten-car-cell-therapy.html Este documento est\u00e1 sujeto a derechos de autor. Aparte de cualquier trato justo con fines de estudio o investigaci\u00f3n privados, ninguna parte puede reproducirse sin el permiso por escrito. El contenido se proporciona \u00fanicamente con fines informativos.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Las condiciones de transducci\u00f3n pueden mejorar la eficiencia de la transducci\u00f3n en las c\u00e9lulas T no activadas. a, Las c\u00e9lulas T humanas reci\u00e9n aisladas se privaron de suero mediante lavado y resuspensi\u00f3n en medio sin suero o se mantuvieron en medio completo durante 36 horas. Luego, las c\u00e9lulas se transdujeron con un vector lentiviral que … Continuar leyendo \u00abLos investigadores acortan el tiempo de fabricaci\u00f3n de la terapia de c\u00e9lulas T con CAR\u00bb<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"","ping_status":"","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[1],"tags":[],"class_list":["post-9589","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-general"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/9589","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=9589"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/9589\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=9589"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=9589"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.biblia.work\/articulos-salud\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=9589"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}