El ensayo inmuno-CRISPR podría ayudar a diagnosticar el rechazo del trasplante de riñón de manera temprana

Crédito: CC0 Public Domain

Cuando un paciente recibe un trasplante de riñón, los médicos lo controlan cuidadosamente para detectar signos de rechazo de varias maneras, incluida la biopsia. Sin embargo, este procedimiento es invasivo y solo puede detectar problemas en una etapa tardía. Ahora, los investigadores que informan en Analytical Chemistry han desarrollado un ensayo basado en CRISPR que puede detectar de manera sensible y no invasiva un biomarcador de rechazo renal agudo en la orina. Algún día, esto podría ayudar a diagnosticar el rechazo antes y sin una biopsia.

Los receptores de trasplantes de riñón deben tomar medicamentos inmunosupresores por el resto de sus vidas para ayudar a evitar que su sistema inmunológico ataque el órgano extraño. Sin embargo, el rechazo del riñón aún puede ocurrir, particularmente en los primeros meses después del trasplante, lo que se conoce como rechazo agudo. Los signos incluyen niveles elevados de creatinina sérica y síntomas como dolor renal y fiebre.

Actualmente, la única forma de diagnosticarlo definitivamente es a través de una biopsia, pero este procedimiento solo puede detectar problemas en una etapa relativamente tardía. Ser capaz de diagnosticar de manera sensible y no invasiva el rechazo renal en una etapa temprana permitiría a los médicos comenzar a tomar medicamentos contra el rechazo antes. Los investigadores encontraron previamente que los niveles altos de una proteína de citocina llamada CXCL9 en la orina de los pacientes con trasplante de riñón eran una señal de advertencia temprana de rechazo. Pero el método actual para medir CXCL9 (un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas o ELISA) no funciona muy bien en la orina, lo que limita su sensibilidad. Por lo tanto, Jonathan Dordick y sus colegas querían desarrollar una técnica más sensible para diagnosticar de forma no invasiva el rechazo renal agudo a partir de la orina.

Los investigadores basaron su método de detección en la tecnología de edición de genes CRISPR/Cas12a. En presencia de la proteína CXCL9, la enzima CRISPR/Cas12a corta una sonda para producir una señal fluorescente. Los investigadores reforzaron la señal fluorescente adjuntando un código de barras de ADN que agrega una gran cantidad de moléculas CRISPR/Cas12a y, posteriormente, se une a un anticuerpo que reconoce CXCL9.

Es importante destacar que, a diferencia de otros métodos de detección basados en CRISPR, no se requiere amplificación por PCR, lo que hace que el método sea más fácil de adaptar a un dispositivo que podría usarse en el consultorio de un médico o incluso en el hogar de un paciente. Cuando se probó en muestras de orina de 11 pacientes con trasplante de riñón, el nuevo sistema midió con precisión los niveles de CXCL9, con valores muy similares a un ELISA. Sin embargo, debido a que el sistema inmuno-CRISPR es aproximadamente 7 veces más sensible que un ELISA, podría detectar el rechazo del trasplante de riñón en una etapa muy temprana, dicen los investigadores.

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El desafío del rechazo del trasplante de órganos Más información: Inseon Lee et al, Highly Sensitive Immuno-CRISPR Assay for CXCL9 Detection, Analytical Chemistry (2021). DOI: 10.1021/acs.analchem.1c03705 Información de la revista: Analytical Chemistry

Proporcionado por la American Chemical Society Cita: El ensayo Immuno-CRISPR podría ayudar a diagnosticar el rechazo del trasplante de riñón de manera temprana el (5 de enero de 2022) recuperado el 29 de agosto de 2022 de https://medicalxpress.com/news/2022-01-immuno-crispr-assay-kidney-transplant-early.html Este documento está sujeto a derechos de autor. Aparte de cualquier trato justo con fines de estudio o investigación privados, ninguna parte puede reproducirse sin el permiso por escrito. El contenido se proporciona únicamente con fines informativos.