Las moléculas de ARN controlan la reparación del ADN humano en células cancerosas

Fig. 1: scaRNA2 se localiza en lesiones de ADN y la pérdida de este ARN conduce a la acumulación de rupturas de doble cadena de ADN e inestabilidad genómica. una estructura esquemática de scaRNA2, que ilustra la región rica en GU, los dominios C/D y las regiones antisentido de snRNA U2. También se muestran los sitios de unión para sondas smFISH, cebadores de qPCR, GapmeR y el sitio de inserción del bucle MS2. b Distribución subcelular de scaRNA2 en células U2OS no tratadas o irradiadas según lo determinado por qPCR. Los valores mostrados son medias SD, n=3. A menos que se indique lo contrario, todos los n=3 se refieren a tres experimentos biológicamente independientes. Ns (no significativo) según lo determinado por ANOVA unidireccional y prueba de comparaciones múltiples de Dunnetts bilateral. c smRNA FISH de scaRNA2 e inmunotinción del marcador corporal de Cajal coilin en células U2OS que expresan scaRNA2 de forma endógena o sobreexpresada durante 24 h (n=3). Los núcleos se tiñeron con DAPI en todos los experimentos de inmunofluorescencia. d smRNA FISH de scaRNA2 e inmunotinción del marcador de daño del ADN H2AX en células U2OS microirradiadas con láser (recuperación de 5 min) que sobreexpresan scaRNA2 durante 24 h (n = 3). smRNA FISH para U2 snRNA se realizó en las mismas condiciones pero sin sobreexpresión de scaRNA2. e smFISH de scaRNA2 en células U2OS FokI transfectadas con un plásmido scaRNA2 durante 24 h y tratadas con Shield y 4-OHT durante 4 h adicionales (n = 3). La inmunotinción de H2AX se realizó en las mismas condiciones pero sin sobreexpresión de scaRNA2. f Inmunotinción de H2AX en células U2OS irradiadas (2 Gy, 1 o 24 h de recuperación) empobrecidas o no de scaRNA2 durante 48 h. El siguiente gráfico muestra el porcentaje de 100200 células (mediaSD, n=3) cuyos núcleos contenían >10 focos H2AX, **p