Un nuevo ensayo simplificado puede mejorar la detección prenatal de alfa-talasemia
En un informe publicado en The Journal of Molecular Diagnostics, los investigadores describen un nuevo ensayo rápido y preciso para el genotipado de alfa-talasemia no delecional basado en la fusión de PCR asimétrica anidada en un solo paso análisis de curvas, que puede mejorar el diagnóstico prenatal, la detección de recién nacidos y la detección de poblaciones a gran escala.
La talasemia es un grupo de trastornos sanguíneos hereditarios que reducen la capacidad de la sangre para hacer circular el oxígeno por todo el cuerpo. La gravedad puede variar de benigna a potencialmente mortal; por lo tanto, es importante identificar lo antes posible a los bebés que pueden desarrollar síntomas asociados con la talasemia, así como a los padres que son portadores. Esto requiere la disponibilidad de herramientas de diagnóstico molecular prácticas y precisas.
«El ensayo de genotipado de alfa-talasemia no delecional desarrollado en este estudio tiene las ventajas de una operación de tubo cerrado de un solo paso, alto rendimiento, velocidad y automatización, que puede satisfacer las necesidades metodológicas de un programa de control de la talasemia en poblaciones a gran escala», explicó Wanjun Zhou, Ph.D., del Departamento de Genética Médica, Facultad de Ciencias Médicas Básicas, Universidad Médica del Sur, Guangzhou, China. .
Dra. Zhou señaló que la estrategia del análisis de fusión de PCR asimétrica anidada en un solo paso supera los cuellos de botella de la alta homología y la estructura secundaria rica en GC que limitaban los tipos de análisis anteriores.
La talasemia afecta hasta al cinco por ciento de la población mundial. . Estos trastornos se caracterizan por niveles bajos de hemoglobina, disminución de la producción de glóbulos rojos y anemia. Los pacientes con talasemia informan fatiga, debilidad, dificultad para respirar, mareos o dolores de cabeza. Un subtipo, la alfa-talasemia, es causado por una o más mutaciones en dos genes diferentes (HBA1 y HBA2) asociados con la producción de las subunidades de hemoglobina alfa-globina. Cada individuo tiene dos copias de estos genes, por lo que pueden verse afectados hasta cuatro genes; esto puede determinar la gravedad de los síntomas y el estado del portador. Aunque el tipo más común de mutación genética asociada con la alfa-talasemia es la delecional (eliminación de una sección de la secuencia del gen), el ensayo en este caso se enfoca en mutaciones puntuales o no delecionales.
Los investigadores probaron la capacidad del nuevo ensayo para detectar cinco mutaciones de talasemia alfa no delecionales. Las cinco mutaciones se identificaron con precisión con una tasa de concordancia del 100 por ciento en un análisis ciego de 255 muestras con genotipos conocidos, según lo determinado por otros métodos analíticos que incluyen gap-PCR, PCR-reverse dot blot (RDB) o secuenciación de Sanger.
Los investigadores también probaron la capacidad del nuevo ensayo para detectar grandes poblaciones. Después de analizar 1250 muestras de sangre, el ensayo mostró una sensibilidad y especificidad del 100 % para todas las mutaciones específicas.
El tiempo total de análisis con el nuevo ensayo fue de poco menos de 2,5 horas. Esto es considerablemente más rápido que otros métodos de prueba de genética molecular, como la secuenciación de Sanger, que requiere 380 minutos, o RDB, que toma 300 minutos.
«Estos otros métodos no son adecuados para su uso en programas de detección a gran escala debido a que tienen limitaciones como la operación engorrosa, el bajo rendimiento, la interpretación subjetiva y la posible contaminación del laboratorio causada por la operación de tubo abierto posterior a la PCR», comentó el Dr. Zhou. «Nuestros resultados prueban que este nuevo ensayo es preciso, confiable, simple y rápido y puede cumplir con los requisitos para el diagnóstico clínico y la detección masiva de alfa-talasemia no delecional». Él cree que la misma estrategia puede usarse en el futuro para el genotipado rápido de otras mutaciones genéticas.
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La rapamicina puede reducir la acumulación de una proteína tóxica -talasemia Más información: Journal of Molecular Diagnostics (2020). DOI: 10.1016/j.jmoldx.2020.03.002 Información de la revista: Journal of Molecular Diagnostics
Proporcionado por Elsevier Cita: Un nuevo ensayo simplificado puede mejorar la detección prenatal de alfa -thalassemia (2020, 29 de mayo) recuperado el 31 de agosto de 2022 de https://medicalxpress.com/news/2020-05-assay-prenatal-alpha-thalassemia.html Este documento está sujeto a derechos de autor. Aparte de cualquier trato justo con fines de estudio o investigación privados, ninguna parte puede reproducirse sin el permiso por escrito. El contenido se proporciona únicamente con fines informativos.